Proprietățile anti-metastatice ale pectinei citrice modificate: un singur glonț, ținte multiple

Vladislav V. Glinskya,b,* și Avraham Razc,*

Informații despre autori ► Informații despre drepturile de autor și licențăPrecizări legale

Versiunea finală editată de editor a acestui articol este disponibilă la Carbohydr Res

Consultați alte articole din PMC care citează articolul publicat.

Mergi la:

REZUMAT

În această mini-lucrare, examinăm capacitatea pectinei citrice modificate (MCP), o polizaharidă complexă, solubilă în apă, nedegradabilă, obținută din coaja și pulpa de citrice și modificată prin intermediul unui tratament cu pH și temperatură ridicată, de a afecta numeroși pași limitatori de viteză în metastazele cancerului. Proprietățile anti-adezive ale MCP, precum și potențialul său de a crește răspunsurile apoptotice ale celulelor tumorale la chimioterapie prin inhibarea funcției anti-apoptotice a galectinei-3 sunt discutate în lumina unei utilizări potențiale a acestei substanțe bazate pe carbohidrați în tratamentul multiplelor malignități umane.

Mergi la:

1. INTRODUCERE

Metastazele, o răspândire a cancerului de la locul creșterii tumorii primare la organele și țesuturile îndepărtate, care provoacă cea mai mare parte a morbidității și mortalității legate de cancer, este de departe cea mai mare provocare clinică asociată cu cancerul. În căutarea substanțelor prezente în mod natural care ar putea fi utile în controlul și tratarea metastazelor canceroase, pectina citrică modificată (MCP), o polizaharidă digerabilă complexă, solubilă în apă, obținută din coaja și pulpa citricelor și modificată prin tratamentul cu pH și temperatură ridicată,1 a apărut ca unul dintre cele mai promițătoare medicamente anti-metastatice. De când au apărut primele rapoarte care indică faptul că MCP este capabilă de inhibarea melanomului1 și metastazarea experimentală a carcinomului de prostată2 în literatura de specialitate, acest compus bazat pe carbohidrați s-a bucurat de o atenție semnificativă a comunității de cercetare în domeniul cancerului. De atunci, s-a dovedit că MCP este eficace in vitro sau in vivo, sau ambele, împotriva carcinomului de prostată,24 colon,5,6 mamar,4,6,7 melanomului,1,8 mielomului multiplu,9 și hemangiosarcomului.10 Așadar, cum afectează această substanță carbohidratată netoxică diseminarea metastatică a diferitelor malignități? MCP se găsește în β-galactoză1 și mecanismul principal de acțiune pentru MCP este prin antagonizarea unei proteine ​​de legare a β-galactozidei, galectina-3 (Gal-3).1-10 Astfel, pentru a înțelege mai bine modul în care MCP acționează asupra răspândirii cancerului metastatic vom urmări celulele neoplazice, pe măsură ce trec prin cascada metastatică și vom discuta modul în care MCP ar putea afecta etapele critice de limitare a vitezei în acest proces prin inhibarea Gal-3 și a interacțiunilor mediate de Gal-3 (mediate de β-galactozidă).

Mergi la:

2. Efectele MCP asupra diferitelor etape în metastază

2.1 ANOIKIS, GALECTINA-3 ȘI MCP

În urma evadării din tumora primară și a intravazării, prima sarcină pe care o întâlnesc celulele neoplazice transmise prin sânge este de a supraviețui apoptozei asociate pierderii ancorajului (anoikis) și unei călătorii prin circulație. S-a demonstrat că galectina-3 protejează celulele canceroase de anoikis11,12 prin reglarea tranziției lor prin ciclul celular, anume prin inducerea unei stopări a ciclului celular într-un punct insensibil la anoikis (faza G1 târzie).11 Acest efect a fost asociat cu inducerea ciclinei D1 (o ciclină G1 timpurie)11 și reglarea descendentă a nivelurilor ciclinei E și A (cicline G1-S),11 precum și cu reglarea în sens crescător a p21 (WAF1/CIP1) și p27kip1.11 Lucrarea anterioară efectuată de Hsieh și Wu a demonstrat că MCP poate efectua reglarea ciclului celular în celule prostatice umane JCA-1 prin reglarea în sens descrescător a ciclinei B și cdc2.13 Este posibil ca reglarea în sens descrescător a ciclinei B și cdc2 indusă de MCP să ducă la acumularea de celule canceroase în G2/M și ulterior la inducerea apoptozei. Prin urmare, este posibil ca MCP să reducă efectul Gal-3 anti-anoikis. Cu toate acestea, în prezent, nu există dovezi experimentale directe privind efectul MCP asupra celulelor canceroase și sunt necesare studii suplimentare pentru a investiga dacă MCP poate crește sensibilitatea celulelor metastatice la această formă de apoptoză.

2.2 EFECTUL MCP ASUPRA ÎNCĂRCĂRII CELULELOR METASTATICE ÎN ORGANELE ȚINTĂ

Următorul pas limitator al vitezei metastazelor canceroase este asociat cu stoparea celulelor tumorale în microvasculatura organelor distante. Rolul Gal-3 în medierea aderenței celulare metastatice la endoteliu este bine stabilit.14 – 18 În plus, se pare că in vitro și in vivo, interacțiunile Gal-3 cu glicoantigenul Thomsen-Friedenreich asociat cancerului mediază atât adeziunea inițială a celulelor canceroase la peretele vascular cât și agregarea homotipică ulterioară a celulelor tumorale la locul de atașare primar de endoteliu.17 Astfel, proprietățile anti-adezive ale MCP au fost, probabil, cel mai mult și mai bine studiate aspecte ale efectelor sale anti-metastatice. Din lucrările anterioare,11,2,8 s-a constatat că efectul anti-metastatic al MCP asupra melanomului B16 de șoarece1,8 și celulelor cancerului de prostată de șobolan MAT-LyLu este legat de capacitatea MCP de a inhiba atât adeziunea celulelor tumorale de endoteliu2 cât și agregarea lor homotipică.1,8 Într-un studiu ulterior,14 Lehr și Pienta au demonstrat că, în panoul de 11 agenți anti-adeziune testați, MCP a fost cel mai puternic inhibitor al adeziunii preferențiale a celulelor cancerului de prostată uman la endoteliul măduvei osoase in vitro. În mod similar, a fost demonstrată o inhibare dependentă de doză a celulelor MDA-MB-435 la celulele endoteliale umane in vitro.6 Și în cele din urmă, în cel mai recent studiu am arătat că MCP este capabil să inhibe formarea in vivo a depozitelor metastazice ale celulelor carcinomului mamar și prostatic uman (Fig. 1) în plămâni și oase cu > 90%.4 Astfel, MCP este un inhibitor eficient al adeziunii celulelor tumorale la endoteliu și al agregării homotipice a celulelor canceroase implicate în blocarea inițială a celulelor metastatice în organe aflate la distanță și în formarea depozitelor metastatice intravasculare.

Martor / Șoarece

 

Figura 1

Efectul MCP asupra formării depozitelor metastatice in vivo ale celulelor carcinomului prostatic metastatic uman DU-145 la șoareci. Șoareci masculi cu vârsta de șase săptămâni HsdIcr:Ha(ICR)-scid au fost injectați intravenos (într-o venă laterală a cozii) cu 1 x 106 celule canceroase marcate fluorescent în 200µl de mediu RPMI-1640 complet (martor netratat, panou superior) sau mediu RPMI-1640 complet, suplimentat cu MCP (panou inferior) 0,25% (concentrație finală g/v). La trei ore după injectare, animalele au fost eutanasiate, plămânii au fost îndepărtați și examinați prin microscopie epifluorescentă.

2.3 EFECTUL MCP ASUPRA INVAZIEI CANCERULUI

După ce celulele tumorale sunt depuse în microvasele organelor țintă, ele se pot fie prolifera intravascular, până când tumoarea metastatică depășește vasul de sânge și invadează parenchimul organelor îndepărtate,19 sau se extravazează înainte de a iniția o creștere tumorală secundară. Procesul de extravazare depinde foarte mult de tendința invazivă a celulelor canceroase. Aceasta implică o serie de interacțiuni ale celulelor tumorale cu proteine ​​ale matricei extracelulare (ECM) asociate cu membrana de bază și cu stroma organului țintă. În acest sens, a fost raportată capacitatea MCP de a inhiba eficient interacțiunile celulelor tumorale mediate de Gal-3 cu proteinele ECM, cum ar fi laminina.8 În plus, s-a demonstrat că polizaharidele pectinei citrice inhibă într-o manieră dependentă de doză invazia prin matrigelul celulelor endoteliale umane6 a celulelor de carcinom mamar uman metastatic MDA-MB-231,7 și a celulelor metastatice bucale umane.7 Pe baza acestor rezultate, este posibil ca efectele in vivo ale MCP asupra metastazelor experimentale a diferitelor tumori maligne să implice inhibarea invaziei celulelor tumorale.

2.4 Efectul MCP asupra supraviețuirii coloniilor metastatice incipiente

În urma arestării inițiale în organele îndepărtate și a extravazării, marea majoritate a celulelor canceroase moare din cauza apoptozei induse de diferiți factori și doar puține (< 2%) supraviețuiesc și dau naștere la micrometastaze.20 Prin urmare, supraviețuirea clonogenică a coloniilor metastatice timpurii este una dintre cele mai importante etape de limitare a vitezei care determină eficiența procesului metastatic. Principala țintă moleculară a MCP, galectina-3, este un regulator important al apoptozei celulelor canceroase.2126 Câteva articole destul de recente examinează în detaliu cum Gal-3 protejează celulele canceroase de diferite forme de apoptoză.25-27 Foarte important, atunci când Gal-3 își exercită efectele sale anti-apoptotice funcționând pe principalele căi de apoptoză (de exemplu mitocondriale),25-27 ar putea juca un rol important în supraviețuirea clonogenică a celulei de cancer metastatic. S-a sugerat că funcția anti-apoptotică Gal-3 ar putea fi vizată de MCP.27 De aceea, inhibarea Gal-3 prin MCP poate avea ca rezultat o supraviețuire clonogenică redusă a celulelor canceroase. Într-adevăr, rezultatele noastre recente10 demonstrează că MCP inhibă eficient supraviețuirea clonogenică a celulelor hemangiosarcomului într-o manieră dependentă de doză (Figura 2), iar această inhibare este asociată cu o creștere a apoptozei celulelor tumorale.10 Astfel, supraviețuirea clonogenică a coloniilor metastatice timpurii reprezintă o altă țintă terapeutică pentru MCP.

Numărul de clone

Concentrația MCP % 

 

Figura 2

Efectul MCP asupra supraviețuirii clonogenice și a creșterii celulelor hemangiosarcomului SVR. Celulele SVR au fost placate la densitate scăzută (200 celule/godeu) în plăci cu 24 de godeuri în prezența concentrațiilor crescânde de MCP (de la 0 la 0,5%). Șapte zile mai târziu, au fost înregistrate colonii ≥ 15 celule. S-a reținut inhibarea dependentă de doză a supraviețuirii clonogene și creșterea celulelor hemangiosarcomului SVR prin MCP. Reprodus cu permisiune din Ref.10.

2.5 EFECTUL MCP ASUPRA ANGIOGENEZEI

Pe măsură ce micrometastazele evoluează în tumori secundare relevante din punct de vedere clinic, ele devin critic dependente de dezvoltarea unor noi vase de sânge care apar prin procesul de angiogeneză. S-a demonstrat că galectina-3 este implicată îndeaproape în morfogeneza și angiogeneza celulelor endoteliale.2831 S-a demonstrat capacitatea Gal-3 de a acționa ca un agent chemoatractant pentru celulele endoteliale și de a induce motilitatea celulelor endoteliale, invazia prin matrigel și formarea tubului capilar, funcționând astfel ca un factor angiogen puternic. 6,28 Prin urmare, capacitatea MCP de a inhiba activitatea angiogenică a Gal-3 a fost presupusă și confirmată cu succes.28 MCP a blocat chemotaxia celulelor endoteliale umane față de galectina-3 într-o manieră dependentă de doză, reducând-o cu 68% la 0,005% (P < 0,001) și inhibând-o complet la 0,1% (P < 0,001).28 MCP a inhibat, de asemenea, formarea tubului capilar in vitro prin celule endoteliale într-un mod dependent de doză.28 În plus, angiogeneza și metastazarea spontană in vivo au fost reduse semnificativ statistic la șoarecii purtători de tumori, hrăniți cu MCP.28 Deoarece terapia anti-angiogenică este considerată în prezent ca fiind unul dintre aspectele cele mai promițătoare și importante ale terapiei cancerului, capacitatea MCP de a inhiba angiogeneza asociată tumorii este o proprietate importantă a acestui potențial medicament anti-metastatic.

Mergi la:

3. Efectul MCP asupra rezistenței celulelor canceroase la chimioterapie

Majoritatea medicamentelor anti-neoplazice utilizate în prezent acționează prin inducerea apoptozei celulelor tumorale pe calea apoptozei intrinseci (mitocondriale).32 Se pare că Gal-3, un regulator important al apoptozei celulelor canceroase, suprimă calea apoptozei mitocondriale.12,21,22,33,34 În consecință, s-a demonstrat că Gal-3 reglează direct sensibilitatea celulelor canceroase la diferiți agenți chimioterapeutici cum ar fi cisplatina,22,34,35 staurosporina,22 etopozida,34 bortezomibul,9 dexametazona9 și doxorubicina.10 Astfel MCP, ca inhibitor Gal-3, poate avea potențialul de a schimba semnificativ sensibilitatea celulelor canceroase la medicamente citotoxice prin suprimarea efectului anti-apoptotic al Gal-3 pe calea apoptozei mitocondriale. Dacă acest lucru este adevărat, atunci ar avea implicații extraordinare nu numai pentru tratarea și controlul metastazelor tumorale, ci și pentru terapia cancerului în general. Până în prezent, s-a demonstrat că inhibarea funcției anti-apoptotice a Gal-3 de către MCP a fost suficientă pentru a inversa rezistența celulară a mielomului multiplu la bortezomib și pentru a spori răspunsul la apoptoza indusă de dexametazonă.9 În studiul nostru recent, tratamentul celulelor hemangiosarcomului cu MCP a crescut semnifiactiv sensibilitatea acestora la apoptoza indusă de doxorubicină, determinând o reducere de 10,7 ori mai mare a IC50 pentru doxorubicineă in vitro (de la 0,0075 ug/ml până la 0,0007 pg/ml).10 Aceste rezultate sugerează puternic că adăugarea de MCP la regimurile terapeutice pentru tratarea afecțiunilor maligne care exprimă Gal-3 ar putea îmbunătăți potențial efectul chimioterapiei.

Într-o notă separată, este interesant faptul că în cel puțin în două studii recente, pe lângă creșterea apoptozei indusă de medicamente citotoxice, s-a raportat capacitatea MCP în sine de a induce apoptoza în celulele canceroase.9,36 Foarte interesant, se pare că inducerea apoptozei de către MCP în celulele mielom multiplu are loc printr-o cascadă de semnalizare între caspaza-8 și caspaza-3 care apare, cu toate acestea, în absența unor schimbări semnificative în potențialul membranei mitocondriale.9 Un studiu interesant care a investigat efectul mai multor forme de pectină citrică asupra inducerii apoptozei în celulele cancerului de prostată uman a fost raportat recent.36 Autorii au raportat că pudra de pectină fracționată disponibilă comercial (FPP) a indus apoptoza de aproximativ 40 de ori mai mult comparativ cu celulele netratate în celulele cancerului de prostată LNCaP și C4-2. În contrast, pectina citrică (CP) și CP modificată cu pH comercializată sub denumirea PectaSol a avut activitate apoptotică redusă până la absența sa. În timp ce compoziția resturilor de glicozil și analizele de legare nu au evidențiat diferențe semnificative între aceste pectine, tratamentul ușor cu bază pentru îndepărtarea legăturilor esterice a distrus activitatea apoptotică a FPP, în timp ce tratamentul termic al CP a condus la inducerea unor niveluri semnificative de apoptoză comparabile cu cele ale FPP.36 Pe baza acestor rezultate, autorii au concluzionat că anumite elemente structurale specifice din pectina citrică sunt responsabile pentru activitatea apoptotică și că această structură poate fi generată sau îmbogățită prin tratamentul termic al pectinei citrice.36 Pe baza acestui studiu, se pare că tratamentul cu pH nu este important pentru generarea formelor de inducție a apoptozei de pectina citrică. Cu toate acestea, studiile anterioare au demonstrat că modificarea pH-ului este critică pentru proprietățile anti-adeziune ale MCP.1,2,8 Astfel, este posibil ca o combinatie de tratament cu pH și temperatură utilizat la prepararea MCP1,2 să fie o combinație optimă pentru generarea polizaharidelor pectice atât cu proprietăți anti-adezive cât și de inducere a apoptozei.

Mergi la:

4. CONCLUZII

Datorită proprietăților sale anti-adezive, de promovare a apoptozei și de inducere a apoptozei, se pare că MCP este capabilă să vizeze mai multe etape critice de limitare a vitezei implicate în metastazarea cancerului (Fig. 3). În plus, prin inhibarea funcției anti-apoptotice Gal-3 și prin creșterea apoptozei induse de medicamentele citotoxice, deține potențialul de a crește semnificativ eficiența unei chimioterapii convenționale. Progresia acestui agent promițător anti-cancer în practica clinică, împiedicată de diferiți factori, a fost destul de lentă. Cu toate acestea, studiile clinice limitate efectuate până în prezent au demonstrat că MCP a crescut în mod semnificativ timpul de dublare a antigenului specific prostatei la pacienții cu cancer de prostată recurent,38 confirmând astfel potențialul său util în tratarea neoplaziei prostatice. Deoarece potențialul și necesitatea dezvoltării produselor farmaceutice și nutraceutice bazate pe MCP devin din ce în ce mai recunoscute,27,36,37 adăugarea MCP la arsenalul de medicamente anti-cancer deține promisiunea de a îmbunătăți tratamentul malignităților multiple umane.

Efectul anti-tumoral al citotoxicelor / MCP Pectină citrică modificată cu pH și termic

Vas de sânge / Celule canceroase purtate de sânge ANOIKIS / Angiogeneză

Adeziune la endoteliu . Agregare homotipică / Invazie extravazare / Supraviețuire clonogenică și creștere

 

Figura 3

O reprezentare schematică a pașilor critici de limitare a vitezei în metastazele cancerului, care ar putea fi vizate în mod eficient de MCP.

Mergi la:

MULȚUMIRI

V.V.G. este susținut de fonduri de la VA Biomedical Laboratory Research and Development Service. A.R. este susținut de grantul NIH R37CA46129

Mergi la:

Note de subsol

Declinarea răspunderii editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus editării, tipăririi și revizuirii probelor rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală. Rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul și toate precizările legale care se referă la jurnal.

Mergi la:

BIBLIOGRAFIE

1. Platt D, Raz A. J. Natl. Cancer Inst. 1992;84:438–442. [PubMed]

2. Pienta KJ, Naik H, Akhtar A, Yamazaki K, Replogle TS, Lehr J, Donat TL, Tait L, Hogan V, Raz A. J. Natl. Cancer Inst. 1995;87:348–353. [PubMed]

3. Hsieh TC, Wu JM. Biochem Mol Biol Int. 1995;37:833–841. [PubMed]

4. Glinskii OV, Huxley VH, Glinsky GV, Pienta KJ, Raz A, Glinsky VV. Neoplasia. 2005;7:522–527.[PMC free article] [PubMed]

5. Hayashi A, Gillen AC, Lott JR. Altern. Med. Rev. 2000;5:546–552. [PubMed]

6. Nangia-Makker P, Hogan V, Honjo Y, Baccarini S, Tait L, Bresalier R, Raz A. J. Natl. Cancer Inst. 2002;94:1854–1862. [PubMed]

7. Sathisha UV, Jayaram S, Harish Nayaka MA, Dharmesh SM. Glycoconj J. 2007;24:497–507. [PubMed]

8. Inohara H, Raz A. Glycoconj J. 1994;11:527–532. [PubMed]

9. Chauhan D, Li G, Podar K, Hideshima T, Neri P, He D, Mitsiades N, Richardson P, Chang Y, Schindler J, Carver B, Anderson KC. Cancer Res. 2005;65:8350–8358. [PubMed]

10. Johnson KD, Glinskii OV, Mossine VV, Turk JR, Mawhinney TP, Anthony DC, Henry CJ, Huxley VH, Glinsky GV, Pienta KJ, Raz A, Glinsky VV. Neoplasia. 2007;9:662–670. [PMC free article] [PubMed]

11. Kim HR, Lin HM, Biliran H, Raz A. Cancer Res. 1999;59:4148–4154. [PubMed]

12. Matarrese P, Tinari N, Semeraro ML, Natoli C, Iacobelli S, Malorni W. FEBS Lett. 2000;473:311–315.[PubMed]

13. Hsieh TC, Wu JM. Biochem. Mol. Biol. Int. 1995;37:833–841. [PubMed]

14. Lehr JE, Pienta KJ. J. Natl. Cancer Inst. 1998;90:118–123. [PubMed]

15. Glinsky VV, Glinsky GV, Rittenhouse-Olson K, Huflejt ME, Glinskii OV, Deutscher SL, Quinn TP. Cancer Res. 2001;61:4851–4857. [PubMed]

16. Khaldoyanidi SK, Glinsky VV, Sikora L, Glinskii AB, Mossine VV, Quinn TP, Glinsky GV, Sriramarao P. J. Biol. Chem. 2003;278:4127–4134. [PubMed]

17. Glinsky VV, Glinsky GV, Glinskii OV, Huxley VH, Turk JR, Mossine VV, Deutscher SL, Pienta KJ, Quinn TP. Cancer Res. 2003;63:3805–3811. [PubMed]

18. Glinskii OV, Turk JR, Pienta KJ, Huxley VH, Glinsky VV. J. Physiol. 2004;554(Pt 1):89–99.[PMC free article] [PubMed]

19. Al-Mehdi AB, Tozawa K, Fisher AB, Shientag L, Lee A, Muschel RJ. Nat. Med. 2000;6:100–102.[PubMed]

20. Chambers AF, Groom AC, MacDonald IC. Nat. Rev. Cancer. 2002;8:563–572. [PubMed]

21. Akahani S, Nangia-Makker P, Inohara H, Kim HR, Raz A. Cancer Res. 1997;57:5272–5276. [PubMed]

22. Yu F, Finley RL, Jr, Raz A, Kim HR. J. Biol. Chem. 2002;277:15819–15827. [PubMed]

23. Moon BK, Lee YJ, Battle P, Jessup JM, Raz A, Kim HR. Am. J. Pathol. 2001;159:1055–1060.[PMC free article] [PubMed]

24. Matarrese P, Fusco O, Tinari N, Natoli C, Liu FT, Semeraro ML, Malorni W, Iacobelli S. Int. J. Cancer. 2000;85:545–554. [PubMed]

25. Nakahara S, Oka N, Raz A. Apoptosis. 2005;10:267–275. [PubMed]

26. Yang RY, Liu FT. Cell. Mol. Life Sci. 2003;60:267–276. [PubMed]

27. Nangia-Makker P, Nakahara S, Hogan V, Raz A. J. Bioenerg. Biomembr. 2007;39:79–84.[PMC free article] [PubMed]

28. Nangia-Makker P, Honjo Y, Sarvis R, Akahani S, Hogan V, Pienta KJ, Raz A. Am. J. Pathol. 2000;156:899–909. [PMC free article] [PubMed]

29. Fukushi J, Makagiansa IT, Stallcup WB. Mol. Biol. Cell. 2004;15:3580–3590. [PMC free article][PubMed]

30. Nachtigal M, Ghaffar A, Mayer EP. Am. J. Pathol. 2008;172:247–255. [PMC free article] [PubMed]

31. Thijssen VL, Hulsmans S, Griffioen AW. Am. J. Pathol. 2008;172:545–553. [PMC free article][PubMed]

32. Pommier Y, Sordet O, Antony S, Hayward RL, Kohn KW. Oncogene. 2004;23:2934–2949. [PubMed]

33. Oka N, Nakahara S, Takenaka Y, Fukumori T, Hogan V, Kanayama HO, Yanagawa T, Raz A. Cancer Res. 2005;65:7546–7553. [PubMed]

34. Fukumori T, Oka N, Takenaka Y, Nangia-Makker P, Elsamman E, Kasai T, Shono M, Kanayama HO, Ellerhorst J, Lotan R, Raz A. Cancer Res. 2006;66:3114–3119. [PubMed]

35. Oishi T, Itamochi H, Kigawa J, Kanamori Y, Shimada M, Takahashi M, Shimoga R, Kawaguchi W, Sato S, Terakawa N. Int. J. Gynecol. Cancer. 2007;17:1040–1046. [PubMed]

36. Jackson CL, Dreaden TM, Theobald LK, Tran NM, Beal TL, Eid M, Gao MY, Shirley RB, Stoffel MT, Kumar MV, Mohnen D. Glycobiology. 2007;17:805–819. [PubMed]

37. McCarty MF, Block KI. Integr. Cancer Ther. 2006;5:150–171. [PubMed]

38. Guess BW, Scholz MC, Strum SB, Lam RY, Johnson HJ, Jennrich RI. Prostate Cancer Prostatic Dis. 2003;6:301–304. [PubMed]

Lasă un răspuns

Completează mai jos detaliile tale sau dă clic pe un icon pentru a te autentifica:

Logo WordPress.com

Comentezi folosind contul tău WordPress.com. Dezautentificare /  Schimbă )

Fotografie Google+

Comentezi folosind contul tău Google+. Dezautentificare /  Schimbă )

Poză Twitter

Comentezi folosind contul tău Twitter. Dezautentificare /  Schimbă )

Fotografie Facebook

Comentezi folosind contul tău Facebook. Dezautentificare /  Schimbă )

Conectare la %s

Acest sit folosește Akismet pentru a reduce spamul. Află cum sunt procesate datele comentariilor tale.